Test de pénétration du mucus cervical

Il s'agit d'étudier l'interaction entre le sperme du conjoint et la glaire cervicale de la conjointe. C'est en cela qu'il est simple, l'interaction étudiée ne fait pas intervenir de témoins[1]. Pour la réalisation de ce test[3] il faut préalablement faire les analyses classiques pour le sperme (spermogramme et spermocytogramme) et le mucus (à savoir une glaire cervicale préovulatoire avec un score de Insler supérieur à 10/15), ainsi qu'observer pour le couple une période d'abstinence de 3-5 jours (normes mondiales de l'OMS), au-delà de l'abstinence la période ne doit comprendre aucune éjaculation afin d'éviter un moindre volume de sperme et une moindre densité de spermatozoïdes[5] - [6].

Une goutte de mucus cervical est déposée sur une lame et une goutte de sperme est déposée de chaque côté de la lamelle (qui va entrer en contact avec la lame) et en contact avec le bord[2].

Le sperme va venir interagir avec le mucus au centre de la lame par la force capillaire, créant ainsi une interface visible entre le mucus et le sperme. Cette préparation va être incubée dans une étuve pendant une demi-heure à la température physiologique humaine (37 °C).

Après quelques minutes de contact des projections en forme de doigts se présentent, elles sont également appelées phalanges de fluide séminales, elles vont entrer dans le mucus. La majorité des spermatozoïdes vont pénétrer cette phalange avant d'entrer en contact avec le mucus.

Après pénétration dans le mucus les spermatozoïdes se séparent de manière stochastique et migrent au hasard. Ils peuvent retourner dans la goutte de sperme au bord de la lamelle, ou s'enfoncer plus profondément dans le mucus. Cependant le mucus va imposer une limite à la migration due aux débris cellulaires ou aux leucocytes.

Ces informations sont celles de la Organisation mondiale de la santé (WHO : World Health Organization en anglais) de 1992[2] :

Le test va donc apporter simplement ces informations permettant en cas de résultat anormal ou médiocre de poursuivre les investigations par un test de contact mucus cervical - sperme ou un test du tube capillaire.

Si le but du test est de détecter une anomalie d'origine féminine (anomalie de la glaire cervicale), un seul échantillon de sperme est utilisé pour plusieurs de glaire cervicale.

De même, si l'objectif du test est de détecter une éventuelle anomalie d'origine masculine (anomalie du sperme), plusieurs échantillons de sperme sont utilisés pour un seul de glaire cervicale[2].

Aussi appelé S - CMCT (Sperm - Cervical Mucus Contact Test)[8], il a pour intérêt de détecter la présence (de manière indirecte[9]) d'anticorps anti-spermatozoïdes dans le mucus cervical ou dans le liquide séminal. La liaison d'anticorps de type IgA[9] va notamment être la cause d'une inhibition de la pénétration et de la migration[2].

Il répond aux mêmes précautions que le test sur lame simplifiée.

Sur une lame est déposé en quantité égale (de 10 à 50 μL) : de la glaire cervicale pré-ovulatoire, et du sperme frais sur un côté de la lame. Les deux sont mélangés. Une autre goutte de sperme est déposée à l'extrémité opposée de la première sur la lame. Chacun des gouttes de sperme va être recouverte d'une lamelle. La préparation obtenue est incubée dans une chambre humide, puis trente minutes à température ambiante.

Après cette période est évalué le pourcentage de spermatozoïdes présentant un mouvement rapide est vigoureux sur place : c'est le shaking rapide. Le shaking est un phénomène traduisant un mouvement frémissant des spermatozoïdes sur place[5] - [10]. Entre dans cette catégorie les spermatozoïdes avec une progression lente ou un déplacement intermittent, n'entre pas dans le comptage les spermatozoïdes avec une faible agitation ou présentant une immobilité. La goutte de sperme préalablement déposée à l'extrémité de la lame sert de témoin.

L'autre catégorie de spermatozoïdes est celle des spermatozoïdes mobiles, comprenant ceux qui avancent ou bougent par à-coup.

Si un pourcentage élevé de spermatozoïdes avec un mouvement de shaking est présent cela traduit une incapacité de pénétration du mucus, et donc une incapacité à atteindre l'ovocyte (qui est au niveau du pavillon du Tube utérin lors de la période de fécondation).

Lorsque le test réalisé s'avère normal (aucune anomalie détecté), le personnel médical va réaliser un test croisé, permettant ainsi de détecter la part relative de chaque conjoint dans l'infertilité du couple[3].

Cependant, il arrive qu'un pourcentage élevé de spermatozoïdes avec un phénomène de shaking ne soit pas forcément révélateur de la présence d'anticorps anti-sperme, des réactions peuvent induire des biais de spécificité[2].

Également appelé Test de Kremer[3], il a pour objectif de d'évaluer la pénétration des spermatozoïdes dans une colonne de mucus cervical d'un tube capillaire (le plus souvent rectangulaire)

Dans le tube capillaire est inséré la glaire cervicale de la patiente (ou de la femme témoin), une extrémité de celui-ci est bouché. Par la partie ouverte le sperme du conjoint (ou de l'homme témoin) est introduit, puis le capillaire est de nouveau fermé.

La préparation obtenue est placée à l'incuvation dans une plaque de Pétri pendant une heure à température du corps humain.

Plusieurs caractéristiques sont évaluées durant ce test : la distance de migration, la densité de pénétration, la réduction de migration et la présence de spermatozoïdes mobiles. Ceux-ci sont évaluées une, deux, ou quatre heures après l'incubation[4], elles sont également relues le lendemain, pour tester la présence de spermatozoïdes ayant migré plus loin[2].

Il s'agit de la distance entre l'entrée du réservoir du sperme et les spermatozoïdes ayant migré le plus loin dans le capillaire[2].

Elle s'évalue à 1 et 4,5 cm de l'entrée du réservoir de sperme. À chacun de ces points le nombre moyen de spermatozoïdes est évalué. La moyenne de ses estimations s'exprime dans plusieurs classes de pénétration spécifiques à la classification du test[2].

Il s'agit de la différence de pénétration du point 1 cm et du point 4,5 cm. Elle s'exprime par différence entre les deux valeurs numériques[2].

La totalité des spermatozoïdes mobiles ou immobiles est évaluée.