Bactérie de forme L

De manière générale, une bactérie ayant perdu sa paroi prend une forme sphérique dite :

• « protoplaste » s'il s'agit d'une bactérie à Gram positif ;
• « sphéroplaste » s'il s'agit d'une bactérie à Gram négatif. la paroi elle est élastique et rigide

On parle aussi parfois de phytoplasme.

Les anglophones nomment les bactéries viables sans parois :

• L-form bacteria ;
• L-phase bacteria ;
• L-phase variant ;
• cell wall deficient (CWD) bacteria (ne pas confondre CWD avec l'acronyme de Chronic wasting desease).

Ces bactéries ont été isolées en 1935 par la biologiste Emmy Klieneberger-Nobel.

Elle les a nommées « L-form bacteria » après le Lister Institute de Londres, où elle travaillait[4].

Deux types de L-formes sont distinguées :

• Les L-formes « instables » qui sont des sphéroplastes capables de se diviser en produisant des L-formes, mais qui peuvent aussi revenir à la morphologie initiale et stable de la bactérie ;
• L-formes stables, qui ne semblent pas naturellement capables de produire dans leur descendance la forme originale de la bactérie.

Quelques espèces parasites de bactéries, dont les mycoplasmes ne présentent pas de paroi cellulaire[5], mais ne sont pas considérées comme L-formes, car non dérivées de bactéries ayant normalement des parois cellulaires.

Les molécules constituant les parois cellulaires varient fortement selon les espèces et plus encore selon les règnes considérés. Chez les plantes et les champignons, ils peuvent aussi varier selon les types cellulaires et le stade de développement.

Chez les plantes, la cellulose est le constituant principal ; chez les bactéries, ce sont des peptidoglycanes, chez les Archées, des glycoprotéine ou pseudopeptidoglycanes ou polysaccharides les constituent. Les champignons possèdent des parois cellulaires faite de la chitine alors que les algues possèdent généralement des parois faites des glycoprotéines et des polysaccharides. Les diatomées utilisent quant à elles l'acide silicique.

Il est possible que ces bactéries ou certaines d'entre elles aient quand même une paroi diaphane et très fragile. En effet, des études plus poussées en chromatographie en phase liquide ont montré qu'au moins dans un cas, des peptidoglycanes étaient quand même synthétisés par la cellule mais en très petite quantité (7 % de la quantité présente dans une bactérie normale). De plus, on a montré que la formation de colonies de mutants sans parois exige du D-glutamate, du diaminopimélate qui sont également spécifiques à la synthèse de peptidoglycanes[3].

Photographie au microscope électronique d'une forme-L de Bacillus subtilis, montrant différentes tailles. Échelle : la barre correspond à 10 micromètres.

Image au microscope à contraste de phase de formes-L- de Bacillus subtilis présentant une large gamme de tailles. Barre d'échelle : 5 micromètres.

La morphologie bactérienne est déterminée par la paroi cellulaire. Les formes-L étant dépourvues de paroi cellulaire, leur morphologie est différente de la souche de bactéries dont elles sont dérivées. Typiquement les cellules de souches « L » sont des sphères ou sont sphéroïdes. Par exemple, la forme-L- de Bacillus subtilis qui a normalement une forme de tige, est une bactérie ronde[6].

Même si les L-formes peuvent se développer à partir de bactéries Gram-positives aussi bien que de bactéries Gram-négatives, la L-forme est toujours Gram-négative, en raison de l'absence de paroi cellulaire.

La paroi cellulaire joue normalement un rôle important lors de la division des cellules qui, chez la plupart des bactéries, se produit par scissiparité. L'absence de paroi cellulaire chez les formes- L-devraient rendre leur reproduction impossible. Elle est pourtant possible, bien que désorganisée, et produisant des cellules-filles d'une grande variété de tailles (de beaucoup plus petite à plus grande que la bactérie « normale »).

Chez les bactéries, la division cellulaire nécessite habituellement une paroi cellulaire et des composants spéciaux du cytosquelette bactérien telles que FtsZ. La capacité des bactéries de forme-L à croitre et se diviser en l'absence de ces deux structures est très rare et pourrait être une relique d'une forme de division cellulaire qui a été importante dans le passé, pour les premières formes de vie[2]. Ce mode de division alternatif semble impliquer l'extension de fines protubérances de la surface cellulaire qui croissent, se « pincent » et se cassent pour former de nouvelles cellules.

Des bactéries L-formes peuvent être artificiellement produites en laboratoire à partir de nombreuses espèces de bactéries qui ont généralement des parois cellulaires, comme Bacillus subtilis ou Escherichia coli. Cela se fait de deux manières :

• la méthode classique consiste à inhiber chimiquement la synthèse du peptidoglycane, soit avec certains antibiotiques, soit en traitant les cellules avec du lysozyme, une enzyme qui digère les parois cellulaires ;
• Une autre méthode combine des nanotechnologies aux principes de l'écologie du paysage. Des dispositifs de microfluidique peuvent être construits en vue d'inhiber la synthèse du peptidoglycane par un microconfinement spatial. Après une dispersion biologique via un micro-corridor biologique (d'échelle submicronique) reliant des microhabitats adjacents, des cellules de type L-form peuvent être constituées[7] - [8].

Faute de parois, les formes-L sont osmosensibles et donc vulnérables à tout changement de salinité de leur milieu de vie. Dans tous les cas, les L-formes doivent être élevées dans un milieu de culture de même osmolarité que celle du cytosol bactérien (une solution isotonique), pour éviter la lyse des cellules par choc osmotique[4]. Les souches-L ainsi produites peuvent être instables, tendant à revenir à la forme normale de la bactérie en restaurant une paroi cellulaire, mais cela peut être empêché par la culture à long terme des cellules dans des conditions similaires à celles qui ont été utilisées pour les produire[9].
Des mutations se produisent plus souvent et plus facilement chez les souches dérivées de bactéries normales, ce qui a été montré par plusieurs études[2] - [4].
Une mutation d'une enzyme impliquée dans la voie du mévalonate dans le métabolisme lipidique a augmenté la fréquence d'apparition de formes-L-de 1000 fois[2]. Le mécanisme n'est pas connu, mais cette enzyme est connue pour être importante dans la synthèse de peptidoglycanes à partir de lipides.

Les formes-L de certaines bactéries pourraient être utiles pour :

• les recherches portant sur les premières formes de vie ;
• les biotechnologies ;
• en médecine, pour mieux comprendre certains mécanismes de résistance bactérienne face à certains antibiotiques (qui détruisent les parois cellulaires), ou face au système immunitaire (si la protéine reconnue par le système immunitaire est une protéine de la paroi cellulaire, la bactérie peut provisoirement échapper aux globules blancs en se débarrassant de ses parois).

Risques ? Des laboratoires peuvent créer des souches-L n'ayant jamais été trouvées dans la nature. Certaines publications ont fait valoir que des formes-L de certaines bactéries peuvent causer des maladies chez l'homme (dont la maladie de Lyme), mais les preuves de lien de cause à effet sont encore fragmentaires et souvent contradictoires, cette hypothèse reste donc controversée[10] - [11].

Deux points de vue extrêmes sont encore à départager :

• certains estiment que les bactéries-L ne sont que des curiosités biologiques et de laboratoire, sans importance clinique ;
• d'autres pensent au contraire qu'elles sont importantes, car causes probables ou méconnues de maladie ou de résistance bactérienne[12].

Les recherches sur les formes- L-de bactéries se poursuivent notamment depuis qu'on a observé dès les années 1980 (après inoculation expérimentale) des formes-L de Nocardia caviae se développer dans les poumons intacts de souris[13], et également capables de développer des mycétomes chez des souris immunodéprimées mais aussi chez des souris saines[14].
Une étude plus récente suggère que de tels organismes peuvent infecter les patients immunodéprimés ayant subi une greffe de moelle osseuse[15].

La formation de souches de bactéries dépourvues de parois cellulaires pourrait aussi jouer un rôle important dans l'apparition d'antibio-résistances bactériennes et notamment dans la résistance croissante aux bêta-lactamines de la part de différentes souches de staphylocoques dorés[16].

Ces souches sont en cours d'examen pour des utilisations possibles en biotechnologie ; comme souches hôtes pour l'expression de protéines recombinantes par exemple[17]. Ici, ce qui intéresse l'industrie est que l'absence d'une paroi cellulaire peut permettre la production de grandes quantités de protéines sécrétées qui s'accumuleraient dans le périplasme des bactéries[18] - [19], sachant aussi que l'accumulation de protéines dans cet espace périplasmique peut être toxique pour la bactérie, ce qui pourrait réduire le rendement d'une production transgénique par ce type de bactéries.