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Techniques de biologie moléculaire

Principales techniques utilisées couramment en biologie moléculaire :

Techniques de biologie moléculaire
Sous-classe detechnique scientifique Modifier
Pratiqué parbiologiste moléculaire, technicien ou technicienne Modifier
Aspect debiologie moléculaire Modifier

Électrophorèse

  • Électrophorèse sur gel : cette technique permet de sĂ©parer des molĂ©cules en fonction de leur taille (appelĂ©e poids molĂ©culaire) en les faisant migrer Ă  travers un gel par application d'un champ Ă©lectrique. Le courant entraĂ®ne les molĂ©cules et les mailles du gel les freinent. Leur migration dĂ©pend donc Ă  la fois de leur taille mais aussi de la concentration du gel; elles iront d'autant plus loin qu'elles sont de petite taille et le gel moins concentrĂ©. Cette technique peut ĂŞtre utilisĂ©e pour sĂ©parer de l'ADN, de l'ARN (gels d'agarose ou d'acrylamide) ou des protĂ©ines (gel d'acrylamide).
  • Électrophorèse sur gel en gradient dĂ©naturant.
  • Électrophorèse capillaire : variante d'Ă©lectrophorèse utilisĂ©e pour le sĂ©quençage de l'ADN.

Voir aussi

Manipulation d'ADN et d'ARN

  • Digestion enzymatique (restriction digest) : technique utilisant des enzymes de restriction pour couper spĂ©cifiquement une molĂ©cule d'ADN afin de la manipuler ou de la cloner.

En fonction de la quantité d'ADN souhaitée des midi-préparations ou des maxi-préparations sont également utilisées.

  • Clonage : technique qui consiste Ă  isoler un fragment d'ADN et Ă  le multiplier Ă  l'identique en l'« insĂ©rant » dans une molĂ©cule d'ADN « porteuse » appelĂ©e vecteur permettant son amplification et on obtient finalement une molecule d'adN recombinant
  • Mutagenèse dirigĂ©e : techniques qui permettent de modifier de façon prĂ©cise et ponctuelle des bases d'un gĂ©nome.

Amplification

  • RĂ©action de polymĂ©risation en chaine : Polymerase chain Reaction (PCR). Cette technique est utilisĂ©e pour amplifier de l'ADN, c’est-Ă -dire obtenir une grande quantitĂ© de copies d'une sĂ©quence nuclĂ©otidique donnĂ©e.

Séquençage

Les différentes méthodes de séquençage :

    • MĂ©thode chimique ou mĂ©thode de Maxam et Gilbert;
    • MĂ©thode enzymatique ou mĂ©thode de Sanger.
    • le pyrosĂ©quençage

Quantification

Autres

Manipulation de protéines

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