Normes McFarland
En microbiologie, les normes McFarland sont utilisées comme référence pour ajuster la turbidité des suspensions bactériennes pour que le nombre de bactéries se situe dans une gamme de concentrations donnée afin de normaliser les tests microbiens. Un exemple est le test de sensibilité aux antibiotiques par mesure de la concentration minimale inhibitrice qui est couramment utilisée en microbiologie médicale et en recherche. Au cours d'une expérimentation de résistance à un agent antimicrobien, si la suspension utilisée est trop concentrée ou trop diluée, un résultat erroné (soit un faux résistant soit faux sensible) peut survenir.
Les normes McFarland originelles ont été établies en mélangeant des quantités spécifiées de chlorure de baryum et d'acide sulfurique. Le mélange des deux composés forme un précipité de sulfate de baryum, ce qui rend la solution trouble. Un étalon de standard 0,5 McFarland est préparé en mélangeant 0,05 ml de chlorure de baryum à 1,175% dihydraté (BaCl2,2H2O), avec 9,95 ml d'acide sulfurique à 1% (H2SO4)[1].
Il existe aujourd'hui des normes McFarland prĂ©parĂ©es Ă partir de suspensions de particules de latex, ce qui allonge la durĂ©e de conservation et la stabilitĂ© des suspensions. La norme peut ĂȘtre comparĂ©e visuellement Ă une suspension de bactĂ©ries dans une solution saline ou un bouillon nutritif stĂ©riles. Si la suspension bactĂ©rienne est trop turbide, elle peut ĂȘtre diluĂ©e avec plus de diluant. Si la suspension n'est pas suffisamment trouble, plus de bactĂ©ries peuvent ĂȘtre ajoutĂ©es.
Normes néphélométriques[2] McFarland :
Standard McFarland | 0,5 | 1 | 2 | 3 | 4 |
Chlorure de baryum Ă 1% (ml) | 0,05 | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,4 |
Acide sulfurique Ă 1% (ml) | 9,95 | 9,9 | 9,8 | 9,7 | 9,6 |
Densité cellulaire approximative (1 à 10.8 UFCs/mL) | 1,5 | 3,0 | 6,0 | 9,0 | 12,0 |
% transmittance* | 74,3 | 55,6 | 35,6 | 26,4 | 21,5 |
Absorbance* | 0,08 Ă 0,1 | 0,257 | 0,451 | 0,582 | 0,669 |
* Ă une longueur d'onde de 600 nm
Normes McFarland standard avec particules de latex issues de Hardy Diagnostics (12/10/2014[3]), mesurées au laboratoire UCSF DeRisi :
Standard McFarland | 0,5 | 1 | 2 | 4 | 6 | 8 |
Absorbance Ă 600 nm | 0,063 | 0,123 | 0,242 | 0,431 | 0,653 | 0,867 |
Références
- Franklin R. Cockerill, Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved StandardâNinth Edition, CLSI, , 12 p. (ISBN 1-56238-784-7)
- (en) Joseph McFARLAND, « THE NEPHELOMETER:AN INSTRUMENT FOR ESTIMATING THE NUMBER OF BACTERIA IN SUSPENSIONS USED FOR CALCULATING THE OPSONIC INDEX AND FOR VACCINES. », Journal of the American Medical Association, vol. XLIX, no 14,â , p. 1176â1178 (ISSN 0002-9955, DOI 10.1001/jama.1907.25320140022001f, lire en ligne, consultĂ© le )
- (en) « McFarland Standard » [PDF], sur dalynn.com,