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Endonucléase

Une endonucléase est une nucléase, qui coupe un acide nucléique en fragments plus courts. Les endonucléases sont capables de couper au milieu de la chaîne, par opposition aux exonucléases qui n'attaquent que les nucléotides situés aux extrémités des fragments.

Certaines endonucléases dites endonucléases de restriction[1] sont des enzymes de restriction qui coupent un brin d'ADN bicaténaire en des endroits caractérisés par une séquence spécifique de nucléotides : le site de restriction. On parle de digestion de l'ADN.

Dans la nomenclature EC, ces enzymes sont classées dans les groupes allant de EC3.1.21 à EC3.1.27, les cinq premiers correspondant à des endodésoxyribonucléases et les deux derniers à des endoribonucléases.

Utilisations

Création d'extrémités cohésives ou non

Une fois le brin d'ADN clivé, on peut se trouver dans deux cas :

  • extrĂ©mitĂ© cohĂ©sives,Ă  bords francs, l'enzyme coupe au mĂŞme endroit sur les 2 brins comme c'est cas pour Hae III qui coupe GG/CC. Dans ce cas les brins ainsi crĂ©Ă©s ne peuvent pas se rĂ©apparier.
  • extrĂ©mitĂ©s cohĂ©sives, Ă  bords collants, l'enzyme de restriction ne coupe pas au milieu de sa sĂ©quence de restriction, comme c'est le cas pour Eco RI qui reconnait la sĂ©quence G/AATTC.

À partir d'extrémité non cohésives identiques, il est possible d'assembler deux fragments d'ADN avec l'utilisation d'une ligase. Ceci peut servir par exemple pour insérer une séquence d'ADN dans un plasmide pour générer un vecteur d'expression.

Cas9 est une endonucléase utilisée pour modifier facilement et rapidement le génome des cellules animales et végétales

Notes et références

Articles connexes

Autres

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