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Vibratome

Un vibratome est un instrument utilisé pour couper de fines tranches de matériau. Il est similaire à un microtome mais utilise une lame vibrante pour couper à travers les tissus. Vibratome n'est pas un nom générique mais une marque déposée de Leica Biosystems Richmond, Inc. aux États-Unis.

Vibratome produit par Leica Biosystems

Description

Un vibratome est un instrument utilisé pour couper de fines tranches de matériau (bien que, généralement, des tranches plus épaisses que celles coupées dans des échantillons enrobés de paraffine à l'aide d'un microtome). Il est similaire à un microtome mais utilise une lame vibrante pour couper à travers les tissus. L'amplitude des vibrations, la vitesse et l'angle de la lame peuvent tous être contrôlés. Des morceaux de tissus fixes ou frais sont incorporés dans de l'agarose à basse température de gélification. (Certains ont réussi sans utiliser l'agarose pour l'incorporation ) Le bloc d'agarose résultant contenant le morceau de tissu est ensuite attaché à un bloc métallique et sectionné pendant qu'il est immergé dans un bain d'eau ou de tampon. Les sections individuelles sont ensuite recueillies avec une brosse fine et transférées sur des lames ou des plaques multipuits pour la coloration[1].

Avantages

  • Pas nĂ©cessaire de dĂ©shydrater les tissus avant l'implantation, ce qui rĂ©duit la perte de constituants cellulaires ;
  • Aucune incorporation de paraffine salissante ;
  • Permet l'incorporation des tissus Ă  l'agarose pour fournir une stabilitĂ© de coupe ;
  • Pas besoin de dĂ©paraffiner et de rĂ©hydrater les coupes avant l'immunocoloration ;
  • Pas de tempĂ©ratures Ă©levĂ©es ou de traitements chimiques agressifs pouvant entraĂ®ner une instabilitĂ© des antigènes ;
  • Aucune lame de microtome spĂ©ciale requise ;
  • Moins de risques d'artefacts causĂ©s par l'incorporation ou la congĂ©lation de la paraffine ;
  • Diminution de l'autofluorescence des tissus en raison de l'absence de fixation au formol et d'incorporation de paraffine ;
  • RĂ©duction du dĂ©lai entre le prĂ©lèvement de tissu et le moment de l'immunomarquage ;
  • Permet la crĂ©ation directe de sections flottantes pour l'immunohistochimie.

Inconvénients

  • Au lieu de rubans, des sections individuelles sont coupĂ©es et collectĂ©es, qui sont plus dĂ©licates et plus difficiles Ă  manipuler.
  • Les sections sont gĂ©nĂ©ralement plus Ă©paisses que celles obtenues avec les mĂ©thodes Ă  la paraffine ; la pĂ©nĂ©tration des anticorps et autres rĂ©actifs peut ĂŞtre plus lente et donc des temps d'incubation plus longs peuvent ĂŞtre nĂ©cessaires. De plus, les sections Ă©paisses peuvent ĂŞtre difficiles Ă  imager avec le microscope. Cependant, les sections Ă©paisses sont compatibles et parfois mĂŞme souhaitables en microscopie confocale.
  • La fixation des sections de vibratome sur des lames de verre peut ĂŞtre difficile voire impossible, en raison de l'Ă©paisseur des sections[2].

Articles connexes

Notes et références

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