Empreinte Ă la DNase
La technique d'empreinte à la DNase est une technique de biologie moléculaire permettant d'identifier le site de liaison d'une protéine sur l'ADN.
Technique
La technique consiste à prendre la séquence d'un fragment d'ADN connue, marqué par radioactivité. Le premier échantillon contient les fragments d'ADN marqués ainsi que la protéine analysée. Dans le deuxième échantillon il n'y a que les fragments d'ADN marqués. Un traitement à la DNase en condition douce est ensuite réalisé (la condition douce permet une seule et unique coupure au niveau de l'ADN). Lorsque la protéine est fixé à l'ADN il n'y a pas de coupure possible sur la séquence de l'ADN où la protéine est fixée.
On réalise ensuite un gel d’électrophorèse sur gel polyacrylamide et on visualise les bandes radiomarquées grâce à un film de rayon-X.
RĂ©sultats
On obtient alors une empreinte (ou footprint) que l'on peut comparer avec notre témoin qui est l'échantillon 2 : l'ADN marqué sans ajout de protéines.