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ATAC-Seq

L'acronyme ATAC-seq vient de l'anglais Assay for Transposase-Accessible Chromatin with highthroughput sequencing. Il s'agit d'une technique utilisĂ©e en biologie molĂ©culaire pour caractĂ©riser les rĂ©gions accessibles de la chromatine ainsi que dans une moindre mesure le positionnement nuclĂ©osomal autour de celles-ci. Cette mĂ©thode fut dĂ©crite pour la première fois en 2013[1].

Description

Le principe de l'ATAC-seq repose sur le mode d'action de la transposase Tn5 sur l'ADN génomique de l'échantillon[2]. Les transposases sont des enzymes catalysant le mouvement de transposons vers d'autres parties du génome. Bien que les transposases naturelles possèdent un bas niveau d'activité, l'ATAC-seq emploie une transposase mutée hyperactive.

Utilisation

Les transposons s'incorporent préferentiellement dans les régions génomiques dépourvues de nucléosomes (nucleosome-free regions en anglais)[1]. Ainsi, un enrichissement de séquences de certains loci du génome indique une absence de nucléosomes ou d'autres interactions ADN-protéine.

Avantages

Les avantages de l'ATAC-seq comprennent :

  1. Des besoins en quantités d'échantillons biologiques bas. 50 000 cellules suffisent pour cette technique, contrairement à d'autres techniques comme le MNase-Seq ou le DNase-Seq qui requièrent au moins 100 fois plus de matériel[2].
  2. Vitesse : le protocole entier requiert 3 heures au total[2].

Notes et références

  1. Jason D Buenrostro, Paul G Giresi, Lisa C Zaba, Howard Y Chang et William J Greenleaf, « Transposition of native chromatin for fast and sensitive epigenomic profiling of open chromatin, DNA-binding proteins and nucleosome position », Nature Methods, vol. 10, no 12,‎ , p. 1213–1218 (DOI 10.1038/nmeth.2688)
  2. Jason D. Buenrostro, Beijing Wu, Howard Y. Chang et William J. Greenleaf, « ATAC-seq: A Method for Assaying Chromatin Accessibility Genome-Wide », Current Protocols in Molecular Biology,‎ (DOI 10.1002/0471142727.mb2129s109)

Liens externes

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