PCR inverse
La PCR inverse ou IPCR est une méthode particulière de réaction en chaîne par polymérase. Elle ne doit pas être confondue avec la transcriptase inverse qui consiste à faire de l'ADN à partir d'ARN.
Elle permet de dépasser la limite connue de la PCR : connaître la séquence. Cette technique de biologie moléculaire sert à amplifier une séquence inconnue. Elle se réalise en trois étapes :
- Insérer une séquence connue au milieu de la séquence inconnue à amplifier ;
- Couper la séquence inconnue avec une enzyme de restriction et religuer les bouts via une ADN ligase pour circulariser ;
- Couper la séquence connue par une enzyme de restriction connue, et démarrer la PCR avec pour amorce la séquence connue.
Références
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