Colonne de biologie moléculaire
Une colonne est un élément souvent présent dans un kit de biologie moléculaire permettant de réaliser des extractions ou des purifications d'acides nucléiques par fixation sur un filtre.
Le schéma ci-contre représente une colonne de fixation de l'ADN placée au-dessus d'un tube collecteur. Marqué en A est le filtre d'hydroxyapatite, substance fixatrice de l'ADN (ayant une grande affinité chimique pour l'ADN).
On fait passer la solution d'extraction des acides nucléiques à travers le filtre par le biais d'une centrifugation.
Colonne d'Ă©lution
Elle est utilisée principalement pour l'extraction et la séparation des protéines. La solution contenant les protéines à séparer traverse la colonne par simple gravité et entrainement par le liquide d'élution (bleu ciel) distribué en goutte à goutte arrivant par le haut de la colonne.
Sur le schĂ©ma deux composĂ©s (bleu et rouge) dĂ©posĂ©s en mĂ©lange en haut de la colonne ayant une affinitĂ© diffĂ©rente pour le substrat de la colonne (A : en grisĂ©), se retrouvent sĂ©parĂ©s et peuvent ĂȘtre collectĂ©s Ă des temps diffĂ©rents en bas de la colonne.
Colonne de filtration
Une colonne de filtration est composée d'un substrat ayant une trÚs forte affinité pour le composé à filtrer.
Par exemple, il existe des colonnes de dĂ©pollution des solutions de bromure d'Ă©thidium (BEt), un composĂ© toxique, qui ne doit pas ĂȘtre relarguĂ© dans la nature (jetĂ© Ă l'Ă©vier). Le BEt est fixĂ© sur le substrat, seul le solvant liquide traverse la colonne et peut ĂȘtre jetĂ©, car dĂ©barrassĂ© du toxique.