La saison 1965 du Championnat de Colombie de football est la dix-huitième édition du championnat de première division professionnelle en Colombie. Les treize meilleures équipes du pays sont regroupées au sein d'une poule unique, où elles s'affrontent quatre fois, deux fois à domicile et deux fois à l'extérieur. À l'issue de la compétition, il n'y a ni promotion, ni relégation.
C'est le Deportivo Cali qui remporte la compétition, après avoir terminé en tête du classement final, avec deux points d'avance sur l'Atlético Nacional et cinq sur le quadruple tenant du titre, le CD Los Millonarios. C'est le tout premier titre de champion de l'histoire du club.
Le conflit opposant les clubs à la fédération colombienne nouvellement créée n'étant toujours pas résolu, le Deportivo Cali ne s'inscrit pas à la prochaine Copa Libertadores.